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Die Chromatographie wird in chemischen Labors häufig eingesetzt, um die Identität einer unbekannten Komponente zu bestimmen. Diese Komponente fließt durch das Säulenwickelmaterial und interagiert mit den Partikeln. Die Wechselwirkungen zwischen den Partikeln und den Komponenten in der Probe basieren auf der Anziehung oder Löslichkeit zwischen ihnen. Moleküle, die keine Wechselwirkung mit den Partikeln des Mantelmaterials haben, dürfen ungehindert hindurchtreten. Die Zeit, die die Moleküle benötigen, um am maximalen Peak eines nicht reaktiven Moleküls vom Injektionspunkt zum System zu gelangen, ist die Totzeit der Säule.
Schritt 1
Verstärken Sie die unbekannte Probe mit einer kleinen Menge einer Verbindung, die nicht vom Säulenmaterial zurückgehalten wird. Die Verbindung passiert die Säule, ohne mit dem Verpackungsmaterial in der Säule zu interagieren.
Schritt 2
Laden Sie die Spritze mit ungefähr 20 Mikrolitern der Probe und führen Sie die Spritzennadel in die Injektionsöffnung ein. Laden Sie die Probenschleife aus dem Ventil, indem Sie die Spritze in das Ventil entleeren.
Schritt 3
Schalten Sie das Chromatographiegerät ein und starten Sie die mobile Phase. Diese Phase fließt durch das Instrument und entnimmt die Probe durch die Säule und den Detektor, die in einem Abfallbehälter enden.
Schritt 4
Aktivieren Sie das Ventil, damit die Probe in den Flüssigkeitsströmungsweg gelangen kann. Dadurch werden die Probenkomponenten auf den Kopf der Säule geladen und die Trennung beginnt.
Schritt 5
Überwachen Sie das Emittersignal des Detektors und identifizieren Sie den ersten Peak im Chromatographen. Die Differenz zwischen der Einspritzzeit und dem Maximum des ersten Peaks, dargestellt durch die Verstärkungskomponente, ist die Totzeit.
Schritt 6
Messen Sie den Abstand zwischen dem Einspritzpunkt und der maximalen Höhe des ersten Peaks. Multiplizieren Sie den Abstand mit der Geschwindigkeit des Papiers oder der Achse, um die Totzeit zu ermitteln.