Die Nachteile der Durchflusszytometrie

Autor: Robert Doyle
Erstelldatum: 18 Juli 2021
Aktualisierungsdatum: 10 Kann 2024
Anonim
Mastering Phospho Flow: Optimizing Immune Cell Activation Assays
Video: Mastering Phospho Flow: Optimizing Immune Cell Activation Assays

Inhalt

Die Durchflusszytometrie, eine Technik zur Charakterisierung mikroskopischer Partikel wie Zellen und Chromosomen, ermöglicht die gleichzeitige Analyse der physikalischen und chemischen Eigenschaften von Tausenden von Partikeln pro Sekunde und anhand verschiedener wissenschaftlicher Parameter. Die Trennung von Zellen durch Fluoreszenz, eine spezielle Form der Durchflusszytometrie, kann auch eine heterogene Mischung von Zellen entsprechend ihrer Fluoreszenzlichtreflexionseigenschaften in zwei oder mehr Stämme trennen. Instrumente, die auf diesem Konzept basieren, sind ein äußerst leistungsfähiger wissenschaftlicher Apparat, der in Forschungs- und Mikrobiologielabors zur physikalischen Trennung von Zellen verwendet wird. Diese Technik ist auch nützlich bei der Diagnose von Krankheiten wie Leukämie (Blutkrebs).

Nachteile der Durchflusszytometrietechnik

Es gibt jedoch einige schwerwiegende Einschränkungen bei der Verwendung dieser wissenschaftlichen Technik. Da die Ergebnisse der Durchflusszytometrie auf aggregierter Ebene analysiert werden, ist es nicht einfach, das Verhalten einzelner Zellen zu beobachten und zu messen. Da diese Technik den Durchgang von Zellen durch einen Flüssigkeitsstrom erfordert, beschränkt sie die Analyse außerdem auf nur suspendierte Zelllösungen. Aus dem gleichen Grund müssen Gewebezellen vom Gewebe disaggregiert werden, indem intakte Gewebe mit einem Enzym behandelt werden, das diese Zellen zur weiteren Analyse hervorhebt.


Niedrige Zellflussrate

Einer der größten Nachteile von Durchflusszytometern ist ihre niedrige Zellflussrate. Selbst bei Hochgeschwindigkeitsabscheidern beträgt die Rate weniger als einige tausend Zellen pro Sekunde. Viele Experimente erfordern jedoch eine große Anzahl von Zellen. Selbst Hochgeschwindigkeitsabscheider müssen also lange arbeiten, was nicht nur teuer ist, sondern auch Qualitätsprobleme verursachen kann, da diese Zellen, die sehr lange Prozesse durchlaufen haben, möglicherweise nicht mehr in Experimenten verwendet werden können. Dieses Problem kann sich verschlimmern, wenn sich die einzelnen Zellen in einer sterilen Umgebung befinden müssen. Obwohl Hochgeschwindigkeits-Durchflusszytometer sterile Zellen liefern können, macht dies den Prozess komplexer und reduziert den Durchfluss.

Bedarf an hochqualifizierten Bedienern

Da das Durchflusszytometer ein sehr hoch entwickeltes Gerät ist, kann es nur von qualifiziertem und hochqualifiziertem Personal bedient werden und mit den Geräten ein akzeptables Nutzungsniveau erreichen.


Durchflusszytometer sind teuer

Durchflusszytometer sind teure Instrumente zu kaufen und zu warten. Ein Laser-Durchflusszytometer, das nur ohne Trennung analysiert werden kann, kostet fast 200.000 R $, während ein lampenbasiertes Zytometer mit rund 150.000 R $ etwas weniger kostet. Durchflusszytometer mit der zusätzlichen Fähigkeit, Zellen zu trennen, können fast doppelt so viel kosten wie ihre billigeren Versionen. Darüber hinaus ist die Durchführung einer Hochgeschwindigkeitstrennung eine weitere wiederkehrende Ausgabe, die normalerweise Tausende von Reais für jede Verwendung kostet.