Wie man BDA (Kartoffeldextroseagar) herstellt

Autor: Florence Bailey
Erstelldatum: 19 Marsch 2021
Aktualisierungsdatum: 3 Juli 2024
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Inhalt

Agar-Dextrose-Kartoffel (BDA) ist ein gutes halbfestes Allzweckmedium, das zur Erzeugung von Pilzen verwendet wird. Es wird auch häufig verwendet, um Pilzarten zu isolieren, zu züchten und zu erhalten. Fertige Petrischalen oder Tuben, die BDA enthalten, können erworben werden, oder der BDA kann schnell mit einer kommerziellen Vormischung hergestellt werden. Es ist jedoch nicht schwierig, eine einfache und effektive Version mit geringen Kosten herzustellen.


Anweisungen

Kartoffel (Zedcor, vollständig im Besitz / PhotoObjects.net / Getty Images)

    Kartoffelextrakt vorbereiten

  1. Legen Sie die Kartoffeln mit ca. 1,2 Liter Leitungswasser in eine Pfanne und lassen Sie sie eine Stunde lang auf einem Herd kochen.

  2. Nehmen Sie die Pfanne vom Herd und kühlen Sie die Flüssigkeit ab, bis sie bequem zu handhaben ist (etwa zehn Minuten).

  3. Gießen Sie den flüssigen Kartoffelextrakt durch einen Filter oder Gaze und sammeln Sie ihn in einem anderen Behälter.

    Die Mischung vorbereiten

  1. Fügen Sie Dextrose und Agar zu einem Liter Kartoffelextraktwasser hinzu.

  2. Testen Sie den pH-Wert der Lösung mit einem pH-Tester-Papier oder einem pH-Meter.

  3. Wenn der pH-Wert über 6,5 liegt, verringern Sie ihn, indem Sie jeweils einen Tropfen Salzsäurelösung hinzufügen und einen weiteren Test durchführen.


  4. Wenn der pH-Wert unter 6 liegt, passen Sie ihn an, indem Sie jeweils einen Tropfen Natronlauge hinzufügen und einen neuen Test durchführen.

    Sterilisation

  1. Gut mischen und in kleinere Mengen von 250 Millilitern teilen. Gießen Sie in vier 500-ml-Durchstechflaschen (jede Durchstechflasche sollte halb voll sein, um nicht zu kochen).

  2. Laden Sie jedes Fläschchen mit einem Stück frei gefalteter Aluminiumfolie auf, damit die Folie nicht herunterfällt, aber auch keine vollständige Versiegelung bildet.

  3. Stellen Sie die Gläser in einen Schnellkochtopf.

  4. Betreiben Sie den Schnellkochtopf gemäß den Anweisungen des Herstellers, um den BDA 15 Minuten lang bei 121 ° C und 15 psi zu sterilisieren.

  5. Schalten Sie den Schnellkochtopf aus und lassen Sie ihn auf Atmosphärendruck zurückkehren, entfernen Sie die Durchstechflaschen und lassen Sie sie abkühlen, bis sie gehandhabt werden können.


    Gießen Sie die Mischung

  1. Richten Sie die Petrischalen auf einer ebenen Fläche aus.

  2. Wenn die Fläschchen auf die Verarbeitungstemperatur abgekühlt sind, das Medium jedoch erstarrt, halten Sie es mit einer Hand fest und entfernen Sie mit der anderen Hand die Folienabdeckung.

  3. Entfernen Sie für jede Petrischale den Deckel mit einer Hand, füllen Sie die Hälfte schnell mit flüssigem BDA auf und setzen Sie den Deckel wieder auf.

  4. Wiederholen Sie den obigen Schritt 3, bis alle Petrischalen gefüllt sind.

  5. Wenn noch BDA übrig ist, die Flasche mit dem Originaldeckel abnehmen, abkühlen lassen und fest werden lassen, den Aluminiumdeckel festziehen und im Kühlschrank aufbewahren.

Wie

  • Die meisten Pilze wachsen unter leicht sauren Bedingungen gut, so dass der endgültige pH-Wert zwischen 6 und 6,5 liegen sollte, obwohl er auf jeden für eine bestimmte Spezies erforderlichen pH-Wert eingestellt werden kann.
  • Lassen Sie die Petrischalenabdeckungen gerade so weit öffnen, dass die Mischung so schnell wie möglich eingegossen werden kann.
  • Es erfordert Übung, um Geschwindigkeit und Effizienz bei der Ausscheidung von Agar in Petrischalen zu erreichen.
  • Nach dem Abkühlen und Verfestigen können BDA-Schalen in Plastik eingewickelt und monatelang im Kühlschrank aufbewahrt werden.
  • Das meiste Leitungswasser enthält Mineralien, die für das Pilzwachstum von Vorteil sind. Wenn das lokale Wasser jedoch extrem mineralische Konzentrationen oder einen sehr hohen oder niedrigen pH-Wert aufweist, ersetzen Sie es durch destilliertes Wasser.

Hinweis

  • Befolgen Sie alle Betriebs- und Sicherheitsanweisungen für den zu verwendenden Schnellkochtopf.
  • Lassen Sie die Flaschenkappen beim Sterilisieren des Dampfkochtopfs frei, um Überdruck zu vermeiden.
  • Beim Umgang mit heißen Behältern hitzebeständige Handschuhe tragen.
  • Tragen Sie eine Schutzbrille, wenn Sie den Schnellkochtopf verwenden, wenn Sie den sterilen BDA entfernen und während des Ausgießens.

Was du brauchst

  • 300 g Kartoffeln geschält und geschnitten
  • Pan
  • Küchensieb
  • PH-Tester oder pH-Meter
  • 1 mol Salzsäure
  • 1 molares Natriumhydroxid
  • 4 500 ml Ehrlenmayer-Glasfläschchen (oder andere autoklavierbare Enghalsbehälter)
  • 10 g Traubenzuckerpulver
  • 20 g Agar
  • Aluminiumfolie
  • Schnellkochtopf
  • Sterile Petrischalen